CENTRO DE VIGILANCIA SANITARIA VETERINARIA

CONDICIONES Y TÉRMINOS DE USO ESPECÍFICOS DEL SERVICIO ON-LINE DE ANÁLISIS
Pre-exportación: Piroplasmosis equina (cELISA + qPCR)

Fundamento de la técnica
La técnica inmunoenzimática ELISA (Enzyme-Llinked Immunosorbent Assay) se basa en el uso de anticuerpos marcados con una enzima (peroxidasa), de forma que los conjugados resultantes tienen actividad tanto inmunológica como enzimática. Al estar uno de los componentes (antígeno o anticuerpo) insolubilizados sobre la placa, la reacción antígeno-anticuerpo queda inmovilizada y por tanto, puede ser revelada fácilmente mediante la adición del conjugado y del sustrato, generando un color observable a simple vista y cuantificable mediante un lector automático.

Los ensayos inmunoenzimáticos de competición “BABESIA EQUI ANTIBODY TEST KIT, cELISA®” (VMRD, USDA, EEUU) y “BABESIA CABALLI ANTIBODY TEST KIT, cELISA®” (VMRD, USDA, EEUU) se utilizan para la detección de anticuerpos frente a Theileria equi y Babesia caballi en équidos, como técnica de diagnóstico y también como técnica recomendada y prescrita por la OIE para el comercio internacional. La sensibilidad del ensayo es mayor que la del resto de técnicas serológicas y la especificidad está entre el 99.2% - 99.5%, tal y como se determinó en un estudio de validación.

La técnica de qPCR (reacción en cadena de la polimerasa cuantitativa) a tiempo real permite la detección de ADN extraído directamente a partir de sangre mediante la utilización de sondas específicas marcadas con fluorescencia que permiten una visualización directa en el termociclador, con las que generalmente se incrementa la sensibilidad y especificidad del ensayo y en la que puede realizarse una cuantificación del ADN del agente de interés.  En el caso de Theileria equi y Babesia caballi, es de gran utilidad realizar una PCR múltiple para diferenciar ambos agentes etiológicos, que pueden causar un cuadro clínico muy similar.

1. Solicitud del servicio on-line
Cuando un usuario quiera solicitar el servicio de análisis deberá seguir los siguientes pasos:

• Alta como cliente: Darse de alta como cliente en la página web del Centro VISAVET de la Universidad Complutense de Madrid (visavet.es)

• Solicitud de análisis:Solicitar el análisis a través de la página web antes indicada siendo de obligada cumplimentación todos los datos requeridos. Una vez completada la solicitud, se generará una hoja ‘Formulario de Solicitud’ que debe firmar y acompañar a las muestras en el momento de su envío. Asimismo deben aceptarse las condiciones de servicio (envío de muestras, análisis de las mismas, envío de resultados y comunicación con el cliente) generándose un presupuesto que debe aceptar.

2. Envío de muestras

• Las muestras se remitirán al Centro VISAVET (Servicio SEVISEQ) en contenedores resistentes a los golpes de acuerdo a las especificaciones exigidas en la legislación española vigente en relación a la evaluación y prevención de los riesgos relacionados con la exposición a agentes biológicos y lo descrito en la ultima guía sobre la reglamentación relativa al transporte de material biológico de la Organización Mundial de la Salud. En caso de duda en relación a las condiciones de bioseguridad en el envio de muestras puede contactar con el Servicio de Calidad y Bioseguridad del Centro VISAVET (scb@visavet.ucm.es).


La dirección es:

• Las muestras irán perfectamente identificadas con el microchip, UELN o nombre del caballo y acompañadas de la solicitud generada en la aplicación web de Solicitud de Análisis (Formulario de Solicitud) totalmente cumplimentada con el nombre, microchip o UELN, edad, raza, y código de la explotación en la que reside el caballo, así como el análisis que se solicita. Esta documentación irá firmada en un sobre fuera del paquete donde se envíen las muestras, de tal modo, que puedan ser consultados sin abrir el paquete.

• Las muestras deben cumplir los siguientes requisitos:
• Tipo de muestras: Sangre completa con anticoagulante (un tubo de al menos 1 ml) y sangre completa sin anticoagulante o suero separado mediante centrifugación (1500 G, 5 minutos) (un tubo de al menos 1 ml).
• Tipo de tubo: Dos tubos de plástico o cristal, con EDTA y sin anticoagulante.
• Cantidad de muestra: Minimo 1 ml de sangre completa EDTA, y 1 ml de sangre completa sin anticoagulante o 0.5 ml de suero separado.
• Conservación: Refrigeración.
• Todas las muestras tendrán indicado el día de la extracción.
• Las muestras irán identificadas con el microchip, UELN o nombre del caballo.
• Situaciones en las que no se aceptarán muestras para su análisis:
• Muestras enviadas que no cumplan lo establecido en las especificaciones exigidas en la legislación española vigente en relación a la evaluación y prevención de los riesgos relacionados con la exposición a agentes biológicos y lo descrito en la ultima guía sobre la reglamentación relativa al transporte de sustancias infecciosas de la Organización Mundial de la Salud.
• Muestras procedentes de un usuario no registrado como cliente en la web del Centro VISAVET.
• Muestras que no incluyan el formulario de solicitud de análisis totalmente cumplimentado.
• Muestras enviadas en tubos con anticoagulante diferente al EDTA para la técnica de qPCR a tiempo real (heparina, fluoruro sódico, citrato sódico, etc.).
• Muestras enviadas en tubos con anticoagulante (EDTA, heparina, fluoruro sódico, citrato sódico, etc.) para la técnica de cELISA. 

3. Envío de resultados

• La disponibilidad de informe de resultados se notificará por correo electrónico a la dirección indicada en el registro. El acceso a este informe para su consulta y descarga se realizará en el área de cliente siendo preciso su autenticación mediante su usuario y contraseña.

• El tiempo medio de disponibilidad de los resultados es de, como máximo, 3 días laborables después de la llegada de la muestra al laboratorio.

4. Tarifas

• Las tarifas vigentes podrán ser consultadas en la web del servicio (visavet.es).

5. Forma de pago

• Tras la aceptación del presupuesto se procederá a su pago. El pago se realizará mediante tarjeta de crédito a través de la web del servicio.

6. Facturación

• Una vez realizado el pago, la Fundación General de la Universidad Complutense emitirá factura de los servicios solicitados. La facturación se notificará por correo electrónico a la dirección indicada en el registro. El acceso a las facturas para su consulta y descarga se realizará en el área de cliente siendo preciso su autenticación mediante su usuario y contraseña.