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Lengua Azul: detección del virus e identificación de células blanco en tejidos procedentes de pequeños rumiantes

Conference in XX Reunión de la SEAPV (Sociedad Española de Anatomía Patológica Veterinaria)

June 20th, 2008

Molina V., Risalde MA., Rodriguez B., Ruiz-Villamayor E., Gomez-Villamandos JC. and Sanchez-Cordon PJ.

El virus de la Lengua Azul (vLA) es un Orbivirus (familia Reoviridae) en el que se incluyen 24 serotipos diferentes, siendo la proteína estructural VP7 común a todos. El objetivo de este trabajo fue la puesta a punto de técnicas inmunohistoquímicas que permitan la detección del virus sobre muestras de tejido incluidas en parafina procedentes de animales infectados con el serotipo 1. La infección se confirmó previamente mediante RT-PCR a partir de muestras de sangre. Aplicando la técnica de la avidina-biotina peroxidasa (ABC), se emplearon 5 anticuerpos monoclonales (AcMo) frente a la VP7 (P1, P2, 2E9, 4, 1H6, Ingenasa, Madrid) no usados previamente para inmunohistoquímica. Los anticuerpos fueron usados a diferentes diluciones y empleando distintos métodos de desenmascaramiento antigénico sobre muestras de tejidos procedentes de cabras y ovejas infectadas, las cuales fueron fijadas en formol tamponado al 10% y solución de Bouin, siendo posteriormente procesadas de forma rutinaria e incluidas en parafina. El antígeno vírico se detectó con los AcMo 2E9, P1, P2 tanto en muestras fijadas en formol tamponado al 10% como en las fijadas con la solución de Bouin. Sin embargo, los resultados óptimos se obtuvieron con el AcMo 2E9 aplicado sobre muestras fijadas con la solución de Bouin y sometidas a un pretratamiento de desenmascaramiento antigénico con tampón citrato (0.01M, pH 6) en microondas. En cabras, los principales órganos donde se detectó la presencia del virus fueron pulmón, bazo, íleon y nódulos linfáticos, mientras que en ovejas el pulmón y
distintos nódulos linfáticos aparecieron como las principales localizaciones del virus. Las células endoteliales se mostraron como las principales células blanco del vLA, aunque su presencia también pudo constatarse en macrófagos, monocitos circulantes, linfocitos, fibroblastos y células estromales de morfología estrellada, probablemente células reticulares. Los AcMo descritos se presentan como una herramienta útil para el diagnóstico e investigación del vLA y de posible aplicación en infecciones con otros serotipos





Participants:

Universidad ComplutenseServicio de Inmunología Viral y Medicina Preventiva (SUAT). Centro de Vigilancia Sanitaria Veterinaria (VISAVET). Universidad Complutense (UCM).

Universidad ComplutenseDepartamento de Sanidad Animal. Facultad de Veterinaria. Universidad Complutense (UCM).


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XX Reunión de la SEAPV (Sociedad Española de Anatomía Patológica Veterinaria)


XX Reunión de la SEAPV (Sociedad Española de Anatomía Patológica Veterinaria)
Jun 18th-20th, 2008
Brena Baja (La Palma)
Spain

TITLE: Lengua Azul: detección del virus e identificación de células blanco en tejidos procedentes de pequeños rumiantes


TYPE: Oral communication


AUTHORS: Molina V., Risalde MA., Rodriguez B., Ruiz-Villamayor E., Gomez-Villamandos JC. and Sanchez-Cordon PJ.


DATE: June 20th, 2008


CITE THIS COMMUNICATION:

Molina V., Risalde MA., Rodriguez B., Ruiz-Villamayor E., Gomez-Villamandos JC. and Sanchez-Cordon PJ. Lengua Azul: detección del virus e identificación de células blanco en tejidos procedentes de pequeños rumiantes. XX Reunión de la SEAPV (Sociedad Española de Anatomía Patológica Veterinaria), Sociedad Española De Anatomía Patológica Veterinaria, Brena Baja (La Palma), Spain, June 20th, 2008. (Oral communication)


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