Comunicación oral en Reunión del Grupo de Microbiología Molecular de la SEM

6 de septiembre de 2016

Ares M., Santos-Lopez A., Bernabe-Balas C., San Millan A., Ortega-Huedo R., Montero N. y Gonzalez-Zorn B.

pB1000 es un plásmido pequeño de la superfamilia ColE1 que codifica el gen blaROB-1. Ha sido descrito en varios patógenos de la familia Pasteurellaceae, donde es estable y confiere alta resistencia a β-lactámicos. En este trabajo estudiamos el hallazgo de un aislado clínico de Pasteurella multocida donde se describió el plásmido pB1000 original cohabitando con otro plásmido pB1000 cuya única diferencia era un SNP en el origen de replicación. Para averiguar cómo afectaba la presencia de esta mutación a la biología del plásmido utilizamos Haemophilus influenzae Rd KW20 como modelo. Las técnicas que empleamos para caracterizar el comportamiento de ambos alelos, tanto de forma independiente como en cohabitación, fueron PCRs cuantitativas, ensayos de competición, tests de susceptibilidad a antibióticos y evoluciones experimentales. Nuestros resultados mostraron que el nuevo alelo del plásmido con el SNP presenta un mayor número de copias que el plásmido original. Esta nueva variante también aporta a la bacteria una mayor concentración mínima inhibitoria frente a ampicilina, así como un mayor coste metabólico. Sorprendentemente, cuando ambos plásmidos coexisten en la misma bacteria, el número de copias, la concentración mínima inhibitoria y el coste metabólico representan la suma de ambos alelos por separado. Este resultado indica que pB1000 original y su nueva variante actúan como plásmidos independientes. Posteriormente, realizamos evoluciones experimentales en presencia y en ausencia de antibiótico. Cuando se mantenía la presencia de ampicilina ambos plásmidos permanecían en las bacterias más de 300 generaciones, gracias a la ventaja que supone el incremento del número de copias. Sin embargo, en ausencia de ampicilina, el nuevo alelo con el SNP en el origen de replicación se perdía, evitándose así el coste que supone mantener un mayor número de copias plasmídicas para la bacteria. En conclusión, hemos descrito un mecanismo por el cual una mutación natural en el origen de replicación de pB1000 puede aportar a las bacterias un mayor nivel de resistencia a antibióticos, siendo un mecanismo reversible para evitar así la desventaja competitiva que supone en ausencia de antibióticos. Financiación: Beca de colaboración UCM

	Servicio de Zoonosis de Transmisión Alimentaria y Resistencia a Antimicrobianos (ZTA). Centro de Vigilancia Sanitaria Veterinaria (VISAVET). Universidad Complutense (UCM).
	Departamento de Sanidad Animal. Facultad de Veterinaria. Universidad Complutense (UCM).

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