Trabajo presentado por Álvaro Fernández Manzano para la obtención del Máster de Investigación en Ciencias Veterinarias

17 de septiembre de 2014

El presente estudio se centra en establecer un protocolo estandarizado de Profiling, específico para el análisis del líquido sinovial en el perro, caballo y cerdo, mediante el uso del equipo ultrafleXtreme™ MALDI - TOF/TOF (Bruker Daltonics). Se ha utilizado el líquido sinovial de 11 caballos (n=7 controles y n=4 casos – que incluye patologías como osteocondritis disecante, lesiones traumáticas, osteoartritis y artritis séptica), 9 perros (n=1 control y n= 8 casos – displasia de codo, rotura del ligamento cruzado anterior y osteoartritis grave con osteofitosis) y 6 cerdos (control n=6). Se realizaron extensiones citológicas del líquido sinovial, que resultaron determinantes para detectar posibles alteraciones inflamatorias y degenerativas. El estudio del perfil peptídico con la metodología de Profiling permitió diferenciar especies mediante la detección de péptidos específicos: en el caballo, de 1516 y 2322 Da; en el perro, de 2846 y 2156 Da; y en el cerdo, de 1308 y 2532 Da. En los caballos del grupo control no se apreciaron diferencias peptídicas entre las articulaciones estudiadas mediante la técnica de Profiling establecida. El estudio peptídico comparativo de los caballos del grupo de los casos con los controles, reflejó la aparición sistemática del péptido de peso molecular 1415 Da en las distintas articulaciones patológicas, a diferencia de los controles. En el grupo de perros, el análisis espectrométrico reveló la presencia del péptido de peso molecular 1824 Da en los animales de los grupos Artritis y Osteoartritis de forma regular. El grupo de cerdos clínicamente sanos (misma raza, sexo, edad y articulación - rodilla) se comportó de forma heterogénea. Así, en los animales que citológicamente tenían cambios inflamatorios y degenerativos apareció un péptido de 1799 Da, inexistente en el grupo de animales citológicamente sanos, como un probable biomarcador de patología articular. El Profiling MALDI-TOF es un método válido, rápido y sensible para el análisis del perfil peptídico del líquido sinovial en distintas especies domésticas