Tesis Doctoral que será defendida por Néstor Porras González en el Centro VISAVET de la Universidad Complutense de Madrid

10 de abril de 2026

La peste porcina africana (PPA) es una enfermedad viral altamente letal que afecta a suidos domésticos y silvestres, con una capacidad de diseminación transfronteriza que la convierte en una de las principales amenazas para la sanidad animal y la economía de la producción porcina a nivel mundial. Su irrupción en el continente europeo y la propagación sostenida en poblaciones de jabalí euroasiático (Sus scrofa) han situado a este hospedador en el centro de la epidemiología de la enfermedad. El presente trabajo se centra en el genotipo II del virus de la PPA (vPPA), actualmente responsable de la mayoría de los brotes en Europa. Dentro de este genotipo, existen variantes con diferente virulencia, desde cepas altamente letales hasta otras atenuadas que pueden servir de base para estudios de inmunidad y potenciales candidatos vacunales.

En este contexto, la presente tesis doctoral tuvo como objetivo principal analizar en profundidad la patología asociada a la infección por el vPPA en jabalíes, explorando nuevos aspectos histopatológicos e inmunohistoquímicos de la enfermedad y su relación con la virulencia de las cepas. Para ello, se plantean cuatro objetivos específicos, recogidos en cuatro artículos científicos.

El primer objetivo permitió diseñar un sistema de graduación y clasificación histopatológica, asociado a unos criterios específicos para la PPA en jabalí. La comparación entre la cepa altamente virulenta (Arm/07) y la naturalmente atenuada (Lv17/WB/Rie1) mostró diferencias notables tanto en la expresión clínica y carga viral, así como en la aparición y extensión de las lesiones. Los ensayos permitieron constatar que los jabalíes infectados con la cepa altamente virulenta desarrollaron una forma aguda, con especial atención a ciertos patrones característicos observados: la depleción linfoide y linfocitolisis, especialmente en tonsilas, bazo y linfonodos; las alteraciones vasculares en linfonodos, bazo, pulmones, hígado, riñones y cerebro; así como la presencia de infiltrados inflamatorios mononucleares en pulmones, hígado y cerebro. Sin embargo, aunque con menor frecuencia, otros órganos también desarrollaron lesiones hemorrágicas e inflamatorias, como el tracto gastrointestinal, la vejiga, las glándulas adrenales y el páncreas; la aparición y extensión de este tipo de lesiones estaba fuertemente influenciada por la prolongación del tiempo de infección. No se mostraron diferencias significativas relativas a la sintomatología, los hallazgos macroscópicos e histopatológicos y la presencia de genoma viral en tejidos entre los animales infectados por vía intramuscular y aquellos infectados por contacto. No obstante, se postula una tendencia a desarrollar lesiones más extendidas, propias de un cuadro agudo tardío, en los animales infectados por contacto. En contraste, los animales infectados con la cepa atenuada manifestaron un cuadro ligero, con lesiones focales y de menor severidad. Se evidenció una ligera reducción de la población linfoide, especialmente a nivel de los folículos de los linfonodos, observándose un aumento en el número de células linfoides en apoptosis, restos nucleares y figuras mitóticas en el centro germinal, lo que indica que ha existido un proceso previo de linfocitolisis leve. Estos hallazgos podrían ser compatibles con un curso transitorio de la infección, caracterizado por la eliminación temprana del virus, pero con un mantenimiento prolongado de la inflamación, sin manifestaciones clínicas evidentes. Este sistema histopatológico, aplicado a múltiples órganos, resultó ser una herramienta reproducible y objetiva para correlacionar hallazgos clínicos, cargas virales y formas patológicas, con un alto valor potencial para la evaluación de futuras vacunas experimentales.

El segundo objetivo se centró en la caracterización de órganos linfoides terciarios (tertiary lymphoid organs, TLOs) generados en jabalíes tras la inoculación/inmunización con una cepa naturalmente atenuada (Lv17/WB/Rie1) y, algunos casos, también desafiados con una cepa altamente virulenta del vPPA (Arm/07). Estos agregados linfoides ectópicos mostraron un mayor grado de maduración en animales inmunizados y posteriormente desafiados, además existía una gran similitud estructural y celular con respecto a los órganos linfoides secundarios. El desarrollo de los TLOs está ligada a un proceso inflamatorio crónico (o transitorio) previo, evidenciando en el estudio, una inmunoexpresión positiva frente al antígeno del vPPA en áreas inflamatorias adyacentes al desarrollo del tejido linfoide. Asimismo, se sugiere que los TLOs inducidos por cepas atenuadas de vPPA, especialmente cuando se encuentran cerca de mucosas, podrían facilitar respuestas inmunitarias protectoras locales similares al tejido linfoide asociado a las mucosas. Sin embargo, su función exacta (protectora o potencialmente patológica) dependerá de múltiples factores, como la localización, la naturaleza del estímulo y la cinética de la inflamación. Se requieren estudios adicionales para esclarecer la dinámica celular y humoral, así como su capacidad real de protección frente al vPPA y su potencial como objetivo en estrategias de inmunidad local.

En el tercer objetivo se documentó por primera vez la presencia de bazos accesorios intrapancreáticos (intrapancreatic accessory spleen, IPAS) en jabalíes tras la inoculación/inmunización con una cepa naturalmente atenuada (Lv17/WB/Rie1) y posteriormente desafiados con una cepa altamente virulenta del vPPA (Arm/07). Los IPAS presentaron una arquitectura comparable a la del bazo principal, compartiendo las mismas alteraciones tisulares en ambos órganos. Además, mostraron inmunoexpresión positiva frente al antígeno del vPPA, evidenciando un tropismo del vPPA por macrófagos en los cordones esplénicos, similar al descrito de forma general en el bazo. Exceptuando la cronicidad o persistencia de la infección, no se identificaron otros factores comunes que pudieran explicar la elevada frecuencia de formación de IPAS. En este contexto, los resultados del presente estudio sugieren que la infección persistente, originada principalmente por la interacción entre cepas atenuadas y altamente virulentas, podría favorecer el crecimiento de bazos accesorios como consecuencia de una mayor demanda de la capacidad fagocítica del sistema fagocítico mononuclear.

El cuarto objetivo abordó el análisis inmunohistoquimico basado en la distribución tisular del antígeno viral, en combinación con la histopatología, en jabalíes inoculados con diferentes cepas del virus, incluyendo una cepa mutante atenuada (Lv17/WB/Rie1-?CD) y una cepa altamente virulenta (Arm/07). Los animales infectados con la cepa de alta virulencia presentaron lesiones hemorrágicas e inflamatorias, junto con una depleción linfoide generalizada, correlacionada con una amplia diseminación viral, la cual se vio ampliamente extendida a los 10 días post-infección. Los animales únicamente vacunados rara vez mostraron una leve depleción linfoide en los linfonodos. Se observó una inmunoexpresión mínima en macrófagos de las tonsilas y de los linfonodos regionales, lo que sugiere una restricción de la persistencia del virus próxima al punto de entrada oral. En algunos casos vacunados (dosis única) y desafiados, se detectaron, de forma exclusiva, macrófagos infectados con presencia de cuerpos de inclusión, asociados con lesiones necróticas multifocales en criptas tonsilares y en senos paracorticales, trabeculares y medulares de diferentes linfonodos. Este hallazgo sugiere que la infección fue controlada de manera eficaz y no se diseminó a otros tejidos. Esta contención podría estar relacionada con la producción de IFN-? por parte de estos macrófagos residentes, respaldando la hipótesis de que los linfonodos desempeñan una función barrera innata, impidiendo la diseminación viral hacia órganos vitales. Este sistema protector podría verse potenciado mediante la inmunidad adaptativa inducida por la vacunación. En contraste, en los animales vacunados con dos dosis y posteriormente desafiados, no se observó inmunoexpresión viral específica ni lesiones histopatológicas asociadas. Estos animales exhibieron estructuras de tejido linfoide bien desarrolladas, lo que indica la resolución de las ligeras alteraciones provocadas por el aislado atenuado. Estos resultados evidencian que la revacunación potencia la seguridad del procedimiento y contribuye a una protección más eficaz frente a la infección, apoyando su valor como estrategia de mejora en el desarrollo de vacunas frente a la PPA.

En conjunto, este trabajo doctoral evidencia que las diferencias histopatológicas e inmunohistoquímicas reflejan de manera directa el grado de virulencia de las cepas del genotipo II. Tales diferencias no solo confirman la correlación entre severidad clínica, daño tisular y distribución antigénica, sino que también abren nuevas perspectivas para el uso de variantes atenuadas como candidatos vacunales experimentales. Los resultados contribuyen a la mejora de protocolos diagnósticos, al fortalecimiento de los programas de vigilancia epidemiológica en poblaciones de suidos silvestres y al diseño de estrategias de control más eficaces frente a esta enfermedad de gran impacto en la sanidad animal en Europa.