Carmen Casal Comendador defendió su tesis doctoral en la Facultad de Veterinaria de la Universidad Complutense de Madrid

28 de enero de 2016

La tuberculosis es una zoonosis bacteriana que representa un importante problema sanitario en el hombre y los animales (domésticos y silvestres), siendo en estos Mycobacterium bovis y M. caprae las especies de mayor relevancia. La enfermedad tiene un gran impacto económico ya que produce un descenso de la producción de los animales y restricciones en su movimiento, además de los costes derivados de su erradicación en el ganado bovino. Actualmente, la tuberculosis en otras especies domésticas como la cabra, comienza a tener relevancia en aquellos países con elevado censo de caprino. Por otra parte, los camélidos de Sudamérica (alpacas y llamas principalmente), se emplean cada vez con mayor frecuencia fuera de su hábitat natural como mascotas y para la producción de fibra. Además, son altamente susceptibles a la enfermedad, habiéndose notificado varios brotes de tuberculosis en estos animales en Europa. Los programas de erradicación se basan en una estrategia de “diagnóstico y sacrificio”, de tal modo que los animales positivos a las pruebas diagnósticas se eliminan de la explotación. Las técnicas diagnósticas oficiales en la Unión Europea son la prueba de la intradermotuberculinización (IDTB) y el test de detección de interferón-gamma (IFN-γ), que detectan la respuesta inmune de base celular. Existen, además, pruebas para la detección de anticuerpos, algunas disponibles comercialmente y otras en fase experimental. Con el objetivo de optimizar el diagnóstico de la tuberculosis en rumiantes (ganado bovino y caprino) y en camélidos (llamas y alpacas), se han realizado siete estudios experimentales, distribuidos en cuatro capítulos, diseñados para cumplir los cuatro objetivos de la presente tesis doctoral.

El capítulo I comprende tres estudios desarrollados para optimizar el rendimiento de las pruebas actualmente en uso para el diagnóstico de la tuberculosis en rumiantes. El primer estudio experimental evaluó el efecto de la posición en la que se inocula la PPD bovina en el resultado de la IDTB, en ganado bovino libre e infectado de forma natural. En ausencia de infección la IDTB no se vio afectada por la localización donde se realizó la prueba, sin embargo, en presencia de infección, la inoculación de la PPD bovina en la zona cervical anterior incrementó la probabilidad de obtener una respuesta positiva a la IDTB. El segundo estudio experimental de este capítulo se realizó para valorar el efecto del criterio de interpretación aplicado en el resultado del test de detección de IFN-γ realizado con el kit Bovigam, empleando muestras de ganado bovino libre e infectado de forma natural. Se observaron diferencias significativas tanto en la especificidad, como en la sensibilidad alcanzadas en función del criterio de interpretación aplicado. En el tercer estudio experimental, último del capítulo I, se comparó el resultado de varias pruebas comerciales para la detección de IFN-γ sobre muestras de ganado bovino infectado de forma natural. En función del fabricante existieron diferencias significativas en la proporción de animales detectados.

El capítulo II incluye el cuarto estudio experimental de la presente tesis doctoral, diseñado para evaluar la interferencia producida con la vacuna M. tuberculosis SO2 en el diagnóstico de tuberculosis en cabras, empleando las PPDs y formulaciones antigénicas alternativas empleadas para diferenciar animales infectados de aquellos vacunados con M. bovis BCG. La especificidad de las pruebas de base celular alcanzó hasta el 100% empleando las formulaciones antigénicas.

El capítulo III de esta tesis tiene como objetivo estudiar la respuesta a las pruebas diagnósticas y las lesiones desarrolladas en ganado caprino infectado experimentalmente con distintas especies del MTBC. Para ello se llevó a cabo un quinto estudio experimental que analizó la respuesta a la IDTB y al test de detección de IFN-γ y valoró el cuadro de lesiones desarrollado en ganado caprino infectado con M. bovis, M. caprae y M. tuberculosis. La especie del MTBC fue determinante para la evolución de la infección, el rendimiento de las pruebas diagnósticas, así como para la severidad de las lesiones desarrolladas en el hospedador.

El capítulo IV, último de esta tesis doctoral, comprende dos estudios para analizar la sensibilidad y la especificidad de la IDTB (simple y comparada) y de una prueba serológica experimental para el diagnóstico de tuberculosis en camélidos de Sudamérica (llamas y alpacas). El sexto estudio experimental se realizó en alpacas infectadas de forma natural, al emplear la IDTB simple se alcanzó una mayor sensibilidad que con la prueba comparada, independientemente de la localización evaluada. Sin embargo, esta fue superior efectuando la lectura de la IDTB 72 horas después de la inoculación de las PPDs. La sensibilidad obtenida con la prueba experimental fue superior cuando se realizó con muestras recogidas 15 días tras la IDTB, confirmando la existencia de un efecto booster. El séptimo estudio experimental (último trabajo de la presente tesis doctoral), se desarrolló en Perú, en llamas y alpacas libres de tuberculosis. La IDTB comparada fue más específica que la simple, independientemente de la dosis de PPD (2.500 IU frente a 5.000 IU), la localización y del momento de la lectura. La especificidad de la serología fue superior cuando esta se realizó con muestras obtenidas antes de la IDTB, además, el empleo en serie de las dos pruebas evaluadas incrementó la especificidad alcanzada con cada prueba por separado.